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當(dāng)前位置：北京百奧創(chuàng)新科技有限公司>>產(chǎn)品>>培養(yǎng)基>> PRS-CCM-3DPRECEDO宮頸癌3D類器官培養(yǎng)基
產(chǎn)品名稱：PRECEDO宮頸癌3D類器官培養(yǎng)基（Cervical Carcinoma Organoid Medium）
產(chǎn)品說明：PRECEDO宮頸癌3D類器官培養(yǎng)基（Cervical Carcinoma Organoid Medium）是一種為促進宮頸鱗癌類器官體外形成和擴增而設(shè)計的培養(yǎng)基,。它是一種無菌的液體混合系統(tǒng)，含有必需和非必需的氨基酸,、維生素,、有機和無機化合物、激素,、生長因子,、微量礦物質(zhì)等。該培養(yǎng)基的*配方可以提供一個較適的類器官擴增所需營養(yǎng)環(huán)境,，選擇性地促進體外人宮頸鱗癌類器官的生長,。
產(chǎn)品優(yōu)勢：
(1) 培養(yǎng)成功率高
(2) 體外持續(xù)擴增
(3) 保持腫瘤特征
(4) 藥敏結(jié)果與臨床數(shù)據(jù)接近
使用說明：
?實驗前準備
（1）消化好的宮頸癌原代細胞懸液,。
（2）15mL無菌離心管、1.5mL離心管,、24孔細胞培養(yǎng)板,、移液器、移液管,、無菌槍頭等表面消毒后放入超凈工作臺中紫外照射30 min,。
（3）提前30min從4℃冰箱取出宮頸癌類器官培養(yǎng)基平衡至室溫，提前從-20℃冰箱取出所需體積的基質(zhì)膠冰上融化,。
?宮頸癌類器官培養(yǎng)
（1）將消化好的宮頸癌細胞懸液計數(shù),，按照1-2萬細胞每孔計算所需的細胞數(shù)。
（2）根據(jù)計算好的體積吸取細胞懸液加入預(yù)冷的1.5mL離心管中,，補齊預(yù)冷的DMEM/F12至所需體積,，將預(yù)冷后的細胞懸液加入等體積的基質(zhì)膠中輕輕混勻（全程冰上操作），然后將細胞與基質(zhì)膠的混合液按照40μL/孔接種于24孔板,。
（3）將接種好的培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱至少30min,，待基質(zhì)膠*凝固，然后沿24孔壁每孔緩慢加入500μL預(yù)先恢復(fù)至室溫的類器官培養(yǎng)基,。
（4）3天后鏡下觀察類器官形成情況,，粒徑大于50μm即認為類器官已經(jīng)形成，每5天更換一次培養(yǎng)基進行培養(yǎng),，持續(xù)觀察類器官大小,，鏡下觀察大部分類器官大小均大于50μm且大小不再增大即可收集類器官進行后續(xù)實驗。
?宮頸癌類器官收集
（1）吸去培養(yǎng)基,，每孔加入200μL基質(zhì)膠解離試劑,，輕輕吹打混勻，收集至15mL離心管中,，37℃解離30min （具體解離時間根據(jù)實際情況決定,，以無明顯大塊膠狀物為準）。
（2）解離之后1500rpm離心3min,，輕輕吸去上清,，待用。
?宮頸癌類器官傳代
（1）解離之后的細胞加入適量的消化酶,，37℃,，200rpm消化（具體時間根據(jù)類器官大小和數(shù)量決定，以無肉眼可見顆粒為準）,。
（2）消化*后1500rpm離心3min,，輕輕吸去上清，使用終止培養(yǎng)基重懸后1500rpm離心3min,，加入預(yù)冷的DMEM/F12培養(yǎng)基進行重懸,，計數(shù),，按照培養(yǎng)步驟操作繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項：
1.本產(chǎn)品在使用前需平衡至室溫,。
2.使用產(chǎn)品時應(yīng)注意無菌操作,，避免污染。
3.為保持本產(chǎn)品的理想使用效果,，不宜將其過夜放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中,。4.請于保質(zhì)期內(nèi)使用本產(chǎn)品，超出保質(zhì)期,，必須放棄使用,。
5.樣本需為官頸鱗癌術(shù)中樣本，且腫瘤細胞比例越高（至少>50%）,，培養(yǎng)成功率越高，不推薦用于少量樣本（如穿刺或者循環(huán)腫瘤細胞）的培養(yǎng),。
6.本產(chǎn)品僅用于科研用途,，不能用于體外診斷。
